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Coloración ácido resistente de Ziehl-Neelsen

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by

gema ramirez

on 26 September 2013

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Transcript of Coloración ácido resistente de Ziehl-Neelsen

Coloración ácido resistente
Coloración acidorresistente de Ziehl - Neelsen
Materiales
Procedimiento
Notas:
Microbacterias
Portaobjetos
Mechero
Asa de siembra
Pipetas
Pinzas de madera
Microscopio óptico Equipo de tinción (barras paralelas)
REACTIVOS:
Fuscina fenicada básica
Alcohol acido 3,0 %
Colorante de contraste: Azul de metileno
Las bacterias ácido alcohol resistentes son bacterias Gram positivas que resisten la decoloración con decolorantes enérgicos, como las soluciones de etanol en ácido clorhídrico (de donde deriva la denominación).
Ciertas bacterias contienen ácidos grasos(ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Las micro bacterias absorben los colorantes solo muy lentamente debido a la elevada proporción de ceras y lípidos en la pared celular.
Coloración acidorresistente de Ziehl-Neelsen
Procesa técnicas bacteriológicas básicas para el diagnóstico clínico
Integrantes:
-Ramírez Ciprián Gema
-Ramos Urías Sarah
Profesor: Aldo Díaz
Grupo:504
Laboratorio
Es un tintado bacteriológico especial y utilizado para identificar organismos ácidos resistentes, en su mayoría mycobacterias (mycobacterium tuberculosis)
Introducción
Fundamento
Origen
Fue desarrollado por Paul Erlich en 1882.
Encontró que el bacilo tuberculoso retuvo un colorante compuesto de cristal violeta y anilla con agua, se realizaron cambios en la metodología, resultando la técnica de Ziehl-Neelsen.
La tinción de Ziehl-Neelsen demuestra la capacidad que tienen algunas bacterias teñidas de resistir a la decoloración por ácidos y alcoholes . Unas de las ventajas de la técnica de Ziehl-Neelsen es que involucra el uso de reactivos con una mejor calidad que aquellos utilizados por Erlich.
Las células son difíciles de teñir, pero una vez teñidas no se decoloran por el alcohol ni por ácidos, esta resistencia se pierde cuando estas se desintegran.




Añadir mas carbol-fucina conforme se evapora: la preparación

No debe quedar seca

ningún momento
Frío
Caliente
Hacer una extensión de la muestra (frotis)
Cubrir el porta objetos con la muestra fijada con carbol-fucina (formula de Zeihl)
Calentar la preparación cuidadosamente en un mechero de Bunsen.
Lavar con agua el exceso de colorante.
Decolorar con la solución alcohol-ácido Hasta que la muestra adopte un color rosa claro (30 seg).
Lavar para detener la coloración.
Cubrir el porta objetos con azul de metileno por 1 min.
Lavar el exceso de colorante.
Dejar secar
Bibliografía
http://www.slideshare.net/HimFreak/coloracin-cido-resistente
http://www.scribd.com/doc/51863770/PRACTICA-4-ZHIEL-NEELSEN
http://www.pomif.com/pages/practicas/bacteriologia/tinciones/acido
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