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Valoración de Vitamina B12 por espectrofotometr{ia

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by

Katia Alvarado

on 9 December 2014

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Transcript of Valoración de Vitamina B12 por espectrofotometr{ia

Preparación de las muestras
Alícuota de 1 mL de una ampolla de Vitamina B12 y colocarla en un balón aforado de 100 mL.
Disolver con agua destilada, aforar y homogenizar
Valoración
Calcular el porcentaje del etiquetado de la ampolla de Vitamina B12, utilizando una relación con las absorbancias obtenidas del espectrofotómetro a una longitud de onda de 361 nm
Resultados
Espectroscopía UV-VIS
Es de emisión de fotones y una espectrofotometría.
Utiliza radiación electromagnética (luz), ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR)
La radiación absorbida provoca transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas
Valoración
Materiales
Ampollas Vitamina B12
Cianocobalamina estándar
Agua destilada
1 Balón 500mL
4 Balones de 100mL
1 pipeta de 1mL
1 pipeta de 25mL
Espectrofotómetro a 361nm
Espátula
Gotero
Balanza analítica
Pizeta
Cianocobalamina
Hígado contiene hasta 80% de la reserva orgánica total de Vitamina B12
Deficiencia:
gastrectomía
anticuerpos contra factor intrínseco
deficiencia dietética (vegetarianos)
síndrome de malabsorción
Valoración de Vitamina B12 por espectrometría UV-VIS
Principio de la espectroscopia UV-VIS
absorción de radiación UV-VIS por una molécula, causando la promoción de un electrón de un estado basal a un estado excitado, liberándose el exceso de energía en forma de calor
Preparación del estándar
Pesar 10 mg de Cianocobalamina al 98,9% y transferir a un balón aforado de 500 mL.
Disolver con agua destilada, aforar y homogenizar.
Alícuota de 50 mL de la solución patrón preparada, transferir a un balón aforado de 100 mL.
Disolver con agua destilada, aforar y homogenizar.

Cianocobalamina
fuentes origen animal
síntesis en intestino grueso
Escenciales para:
crecimiento
nutrición
eritropoyesis
producción de células epiteliales
conservación de la mielina
Gracias
Fórmulas utilizadas
Discusión
Las absorbancias obtenidas para la valoración de la vitamina B12, estuvieron cerca del valor del patrón
Errores por el patrón, vencido y no refrigerado
Porcentaje de cianocobalamina de 126.6%.
Según la farmacopea: 95-115%
Ampollas analizadas no cumplen con esta disposición
Recomendaciones
Mantener el patrón según su especificación.
Verificar el inventario del laboratorio para descartar materiales en mal estado
Utilizar la menor cantidad de patrón debido a su alto precio.
Mantener en buen estado el equipo de medición electrónico
Conclusiones
El porcentaje no está dentro del rango por el patrón vencido.
Longitudes de onda afectadas por patrón en mal estado.
Patrón fuera de refrigeración
Procedimiento es simple, muy útil para las prácticas en el laboratorio, pero su alto precio lo deja fuera de la elección
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