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Seminario osmorregulación

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by

Nahuel Pallitto

on 5 October 2013

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Transcript of Seminario osmorregulación

Resultados:
Concentración de Na+ and Cl– en el contenido intestinal
Tasa de ingesta de agua
Metodología:
Se miden las variables antes, 12h, 3 y 7 dias despues de tranferencia

Tasa ingesta de agua=
vol de agua tomado por tracto/ masa de pez*6h
Plasticity of osmoregulatory function in the killifish intestine: drinking rates, salt
and water transport, and gene expression after freshwater transfer
Flujo de agua intestinal y flujo iónico
Expresión génica intestinal
Actividad Na+/K+-ATPase intestinal cortisol en plasma
INTRODUCCIÓN
Discusión
El alimento ingerido es una fuente mayor de iones que el agua que ingiere en agua dulce.

Killfish probablemente aumente la absorción de iones para acceder a la reserva de iones de los alimentos y no para absorber mas agua, ya que in vivo la tasa de absorción neta de agua es mínima.

La diferencia de flujo neto entre Cl- y Na+ se podria deber a que el Cl- es intercambiado por dos vias
Discusión:
Kill fish transferido al agua dulce potable reduce su tasa de consumo en un 68% en 12 hs.

La caida inicial de la tasa de consumo parece recuperarse ligeramemte con el tiempo en agua dulce.
Discusión:

Después de que el agua se ingiere, su composición en el intestino se ajusta cerca de la composición del liquido extra celular.

Resultados esperados sobre la base de estudios previo en peces.
Discusión:
En contraste con la hipótesis inicial, la absorción intestinal de agua aumentó en gran medida después de la transferencia a agua dulce. ----> pero fue una respuesta transitoria (Cesó a los 7 días)


Esto sugiere que la absorción de agua por el intestino cae mas lento, que lo indicado por las tasas de consumo solo, PERO..
Resultados:
Metodología:
Se mide antes y 12 hs después de transferencia

Se evalúa Concentraciones libres de Na y Cl después de 24 hs o 3 dias de ayuno

Vísceras muy pequeñas no fueron reportadas
Resultados:
Discusión:

Los cambios observados de las tasas de transporte de iones intestinales se debe a la regulacion post-transcripcional de Na+ K+ ATPasa y a que estos cambios pueden ser parcialmente controlados por el cortisol en plasma (de acuerdo con la figura 2b)
Resultados:
Metodología:
Se mide antes, 12hs, 3d y 7d despues de la tranferencia

Se usa plasma para Na y Cl, parte int(mucosa) y ext ( serosa) de intestino para flujo de iones, masa del saco para transporte de fluidos
1)
2)
3)
4)
5)
Discusión:

La fuerte correlación entre la tasa de transporte de agua y las tasas netas de flujo de Na+ y K+ sugieren que los cambios de absorción de agua estan totalmente impulsados por el transporte iónico transepitelial (y por otros mecanismos menos importantes como aquaporinas)
Metodología:
Se mide 12hs, 3d y 7 d despues de la tranferencia( BW y FW)

Genes: Na+/K+ -ATPasa
CFTR
NKCC
CA2
14-3-3a
Curva standar con EF1a
Resultados:
Vía HCO3- ligado
Vía Na+ ligado
Discusión:

En contraste con la hipótesis inicial, los niveles de expresión de los genes no cambio al transferirlos a agua dulce.
Vía de efluencia adicional para el cloruro, observada en varios peces marinos
PERO, como aparte de los resultados obtenidos, en otro estudio se vio un exceso de [Na+] sobre [Cl-] y un pH muy alto en el fluido rectal de trucha pasada a agua dulce.
Metodología:
Se mide antes, 12hs, 3d y 7d despues de tranferencia ( BW y FW)

Se usa tracto intestinal para Na+/K+ -ATPasa y plasma para cortisol
sugiere lo contrario
Killifish Fundulus heteroclitus
Especie eurihalina estudiar plasticidad osmoregulatoria
Se encuentra en esturarios o pantanos salados de la costa este de Norte America
Intestinales
Mecanismos fisiológicos adaptativos
Branquiales
Disminución pérdida de iones por inactivación de proteinas transportadoras de iones
Absorción branquial de iones por proteinas transportadoras de absorción iónica
Disminuye absorción agua
Aumenta absorción de iones
NO SE SABE COMO SE MODULA LA RESPUESTA INTESTINAL FRENTE A LA TRANSFERENCIA A AGUA DULCE
Funcionamiento intestinal
Absorción de agua mediada por el transporte iónico transepitelial
Absorción iónica mediada por transportadores apicales y basolaterales
OBJETIVO
Variables a analizar
HIPÓTESIS
Caracterizar función intestinal en killifish Fundulus heteroclitus luego de ser transferido de agua salobre a agua dulce.
Tasa de agua bebida
Agua intestinal y transporte iónico
Actividad Na+/K+ ATPasa
Plasma cortisol
Expresión de genes potencialmente involucrados en el transporte iónico
Internalización de la proteína
Fosforilación e inactivación
Supresión de la expresión de transportadores iónicos
Transporte apical
cotransportadores Na+/K+/2Cl-
contransportadores Na+/Cl-
canales CFTR para Cl-
intercambio de Cl- por HCO3-
Transporte basolateral
Na+/K+ ATPasas
genera gradiente elqctroquímico para todo el proceso
Se espera que disminuya el transporte de agua e iones y que este último este asociado a cambios en la expresión de los genes transportadores evaluados.
Se debería estudiar las posibles
consecuencia de esa estrategia
ácido-base en un pez de agua dulce!
me voy a dormirrr
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