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Celulas Madre,calidad de vida

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Alberto avila

on 21 August 2013

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Transcript of Celulas Madre,calidad de vida

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA
CARRERA DE CIRUJANO DENTISTA
Ingeniería tisular en las ciencias odontológicas
AUTORES:
C.D. JOSÉ T. CANO BROWN
C.D. MARTÍN ASCANIO BALDERAS
MTRO. CARLOS GALLARDO LEYVA
ALUMNO ALBERTO JIMÉNEZ ÁVILA
Determina el nivel regenerativo que puede tener una terapia celular.
¿Qué son las C.M.?
Son Células indiferenciadas con capacidad para auto-renovarse y diferenciarse en las diferentes estirpes celulares.
Clasificación de C.M.
De acuerdo a:
ORIGEN
POTENCIAL DE DIFERENCIACIÓN
Clasificación según su origen
Origen embrionario Origen adulto
Origen adulto
Se define como una célula progenitora, autorrenovable, capaz de regenerar uno o más tipos celulares diferenciados.
Clasificación según su potencial de diferenciación
C.M. Totipotente (organismo completo)
C.M. Pluripotentes (cualquier estirpe celular)
C.M. Multipotentes (subconjunto de tipos celulares)
C.M. Oligopotentes (subconjuntos màs reducidos)
C.M. Unipotentes (un único tipo celular)

C.M. Multipotentes
Dan origen a distintos tipos celulares.
Las células madre de origen dentario pueden diferenciarse en condrocitos, adipocitos, fibroblastos osteocitos, miocitos, neurocitos.
C.M. DE ORIGEN DENTAL
Pertenecen al grupo de C.M. adultas, siendo multipotentes teniendo la capacidad de formar células con carácter osteo/odontogénico, adipogénico y neurogénico.
CLASIFICACIÓN DE LAS C.M.D.
C.M. de la pulpa dental (DPSC)
C.M. de la papila apical (SCAP)
C.M. de dientes temporales exfoliados (SCHED)
C.M. de ligamento periodontal (PDLSC)
C.M. de folículo dental (DFPC)
C.M. de rugas palatinas (SCPR)

C.M. DE LA PULPA DENTAL
Son células madres multipotentes.
Al aumentar la edad del individuo, la disponibilidad de estas células se van reduciendo.
Poseen una gran capacidad de diferenciación.
C.M. DE PAPILA APICAL
Se encuentran células madre entre la papila apical y la pulpa.Son las precursoras de los odontoblastos primarios.Responsables de la formación de la dentina radicular.
C.M. DIENTES TEMPORALES EXFOLIADOS
Se consideran una importante fuente de células madre de fácil obtención.
Tienen el potencial para diferenciarse en células angiogénicas, cuya capacidad de inducción se considera fundamental para cualquier tipo de regeneración con tejido conjuntivo.
Desde el descubrimiento de las células madre de pulpa dental en dientes permanentes en el año 2000 por Gronthos y cols.
1.- S. Gronthos, M. Mankani, J. Brahim, P. Gheron Robey y S. Shi. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. PNAS, diciembre 5, 2000, volumen 97, numero 5, 13625- 13630.
Análisis de órganos dentarios
Paciente femenino de 25 años de edad
Órgano Dental 48
Paciente masculino de 22 años de edad.
Órgano Dental 38
Preparación de paciente y anestesia
Bloqueo de nervio alveolar inferior, con Carpulle,
aguja larga y lidocaína con epinefrina al 2%.
Exposiciones de Órganos Dentales
Incisión con Bisturí #3 y hoja #15
Luxación con elevador recto No. 131
Obtención y almacenamiento
Penicilina Estreptomicina Anfotericina con solución fisiológica
Obtención y almacenamiento
Después de cada extracción, los órganos fueron depositados en solución salina con antibiótico y antimicótico (aproximadamente 4°C)
UASLP
LABORATORIO DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍA TISULAR
Procesamiento de Órganos Dentales
Corte horizontal a nivel del tercio cervical del órgano dental por las caras axiales para exponer la pulpa dental a nivel coronal.
Área de cultivo
Campana de flujo laminar
Fragmentación mecánica de pulpa dental
Cortes de pulpa dental
con hoja de bisturí #15 , dando aproximadamente dimensiones de 1mm de tamaño
Tiempo de espera
*Posterior a la fragmentación mecánica del tejido pulpar, se colocan en la caja de cultivo y dejamos los fragmentos de 5 a 8 minutos para lograr adhesión a la superficie de la caja.“Primer Criterio para determinar Presencia de células mesenquimales “*Colocación de 5mL. De medio DMEM.
2.-Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement M Dominici1, K Le Blanc2, I Mueller3, I Slaper-Cortenbach4, FC Marini5,DS Krause6, RJ Deans7, A Keating8, DJ Prockop9 an
Incubadora con Atmósfera de CO2
Incubación del cultivo
por 4 semanas.
5% de CO2
95% Oxigeno
37° C.
Primera fase.
Explante de pulpa dental donde se aprecia la migración celular.
Proliferación celular alrededor de 30 días
Colonia clonogénica de células madre de pulpa dental
Se recuperan con una pipeta estéril y se colocan en tubos.
Recuperación de células madre.
2.-Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement M Dominici1, K Le Blanc2, I Mueller3, I Slaper-Cortenbach4, FC Marini5,DS Krause6, RJ Deans7, A Keating8, DJ Prockop9 an
Selección de marcadores
Observación con microscopio confocal.
Negativo
CD 34
Inmunofluorescencia
Marcador de superficie CD 44 y STRO-1
En la regeneración de tejidos orales, se pueden emplear células madre que provienen del ligamento periodontal, pulpa dental, papila apical radicular y dientes deciduos).

Lineas de investigación
2.-Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement M Dominici1, K Le Blanc2, I Mueller3, I Slaper-Cortenbach4, FC Marini5,DS Krause6, RJ Deans7, A Keating8, DJ Prockop9 an
Las células madre provenientes de tejidos dentales son una útil alternativa para la regeneración de tejidos , ya que se pueden expandir y cultivar.
Existe la posibilidad de aplicar las células madre de pulpa dental en terapias para ingeniería tisular ósea.
1.-S. Gronthos, M. Mankani, J. Brahim, P. Gheron Robey y S. Shi. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. PNAS, diciembre 5, 2000, volume 97, numero 5, 13625- 13630.
2.-Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement M Dominici1, K Le Blanc2, I Mueller3, I Slaper-Cortenbach4, FC Marini5,DS Krause6, RJ Deans7, A Keating8, DJ Prockop9 and EM Horwitz
3.-Ingenieria tisular: aplicación de las celulas troncales Pluripotenciales en cirugia ortopedica y traumatológica, ForroilF,Esparza R., Área de investigación. Hospital FREMAP Majadahonda. Trauma Fund MAPFRE (2008) Vol. 19 nº 2:88-101
4.-H. Shiba, Y. Uchida, K. Kamihagi, M. Sakata, T. Fujita, S. Nakamura, T. Takemoto, Y. Kato y H. Kurihana. Transforming Growth Factor b1 and Basic Fibroblast Growyh Factor Modulate Osteocalcin and Osteonectin/SPARC Syntheses in Vitamin D-activates Pulp Cells. L DENT RES. 2001; 801653-1659.
5.-S. Gronthos1,5, J. Brahim2, W. Li3,L.W. Fisher1, N. Cherman1, A. Boyde4,P. DenBesten3, P. Gehron Robey1,and S. Shi1. Stem Cell Properties of Human Dental Pulp Stem Cells. J Dent Res 81(8):531-535, 2002.
6.-Masako Miura, Stan Gronthos, Mingrui Zahao, Larry W. Fisher, Pamela Gheron Robey y Songatao Shi. SHED: Stem cells from exfoliated deciduos teeth. PNAS, mayo 13, 2003, volume 100, 5807-5812.
7-.Noriaki Koyama, DDS, Yasunori Okubo, DDS, PhD, Kazumasa Nakao, DDS, and Kazuhisa Bessho. Evaluation of Pluripotency in Human Dental Pulp Cells. J Oral Maxillofac Surg. 2009 Mar;67(3):501-6.
8.-Seo BM, Miura M, Gronthos S, Bartold PM, Batouli S, Brahim J, Young M, Robey PG, Wang CY, Shi S. Investigation of multipotent postnatal stem cells from human periodontal ligament. Lancet. 2004 Jul 10-16:364(9429):149-55
Bibliografía

9.-Miriam Magallanes Fabian, Bruno Carmona Rodríguez, Marco Antonio Alvarez Perez. Aislamiento y caracterización parcial de células madre de la pulpa dental. Revista Odontológica Mexicana. Volumen 14, marzo 2010; 15-20.9-55
10.-Gronthos S, Mankani M, Brahim J, Gehron Robey P, Shi S. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci USA. 2000; 97:13625-13630.
11.-D’Aquino R, Papaccio G, Laino G, Graziano A. Dental Pulp Stem Cells: A Promising Tool For Bone Regeneration. Stem Cell Rev. 2008; 4:21-26.
12.-Zhao Z, Wang Y, Wang D, Liu H. The Regulatory Role of A Disintegrin and Metalloproteinase 28 on the Biologic Property of Human Periodontal Ligament Stem Cells. J Periodontol. 2010; 81:934-944.
13.- Sonoyama W, Liu Y, Yamaza T, Tuan RS, Wang S, Shi S et al. Characterization of Apical Papilla and its Residing Stem Cells from Human Immature Permanent Teeth –A Pilot Study. J Endod. 2008; 34(2):166-171.
14.-Zheng Y, Liu Y, Zhang CM, Zhang HY, Li WH, Shi S et al. Stem Cells form Deciduous Tooth Repair Mandibular Defect in Swine. J Dent Res. 2009; 88(3):249-254.
15.-Nagamoto K, Komaki M, sekiya I, Sakaguchi Y, Noguchi K, Oda S et al. Stem cell properties of human periodontal ligament cells. J Periodont Res 2006; 41:303-10.
16.-Yang X, van der Kraan PM, Bian Z, Fan M, Walboomers XF, Jansen JA. Mineralized Tissue Formation By BMP2-transfected Pulp Stem Cells. J Dent Res 2009; 88(11):1020-5.
C.D. José Cano Brown. (jose_canobrown@yahoo.com.mx)

C.D. Martin Ascanio Balderas (martinascaniob@hotmail.com)

MTRO. Carlos Gallardo Leyva (dr.carlosgallardo@gmail.com)

Alberto Jiménez Ávila (aljimenezavila@gmail.com)|
XXXII COLOQUIO DE INVESTIGACIÓN
21 y 22 de agosto
Técnica de cultivo por explante.
Varios estudios afirman que el ligamento periodontal tiene poblaciones de células que pueden diferenciarse tanto hacia cementoblastos como hacia osteoblastos . La presencia de múltiples tipos de células en el periodonto sugiere que este tejido contiene C.M. llamadas PDLSC (Periodontal Ligament Stem Cells) que mantienen la homeostasis y la regeneración del tejido periodontal.
Conceptos básicos: Triada
Ingeniería tisular
Unidad biopsicosocial
Calidad de vida
Línea de investigación
Obtención de células madre a partir de pulpa dental
APLICACIONES DE C.M
EN ODONTOLOGÍA

La ingeniería tisular basada en C.M.D tiene un futuro prometedor dentro de las ciencias odontológicas.
Se ha demostrado que las células madre pueden regenerar: dentina terciaria, ligamento, encía
hueso, y de esta forma contribuir a la
reparación de deficiencias esqueléticas
craneofaciales.

A mediano plazo se intentará inducir a las células madre a linajes osteogénicos en biomodelos.
A largo plazo se desarrollarán casos clínicos controlados con la intención de reparar defectos óseos en maxila y mandíbula.
Aplicaciones Clínicas
Las aplicaciones clínicas son multiples

Ingeniería Tisular VS Implantes
Tratamiento personalizado
Sin problemas de rechazo inmunológico
A largo plazo, ser mas económico
De menor invasión a otra región del
cuerpo humano
Reparación de dentina
Reparación de otras
estructuras
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