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cromatografia en columna

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by

Vanessa Utreras

on 19 January 2015

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Transcript of cromatografia en columna

Generalidades
CROMATOGRAMAS
Cromatografía Líquida de Adsorción en Columna
Cromatografía de permeación en gel
CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA TRADICIONAL O ESTÁNDAR
Técnica basada en la adsorción y solubilidad.
Se visualizan la partición solido-liquido ya que existe un equilibrio dinámico entre adsorción y desorción (elución).




LA ELUCIÓN EN CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
Y ALGUNOS METODOS PARA MEJORAR EL RENDIMIENTO DE LA COLUMNA

Es una técnica física de purificación, puesto que permite aislar los compuestos deseados de una mezcla.
Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.



CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
FASE ESTACIONARIA:
Esta fija en un lugar, en la columna o superficie plana.

FASE MÓVIL:
Se mueve sobre la fase estacionaria o a través de ella, arrastrando consigo la mezcla de analitos, esta puede ser un gas. liquido o fluido supercrítico.

En la cromatografía en columna la separación se consigue haciendo fluir la mezcla a través de una columna de adsorbente. Los compuestos emergen de la columna a tiempos diferentes, y pueden ser recogidos en fracciones separadas.

















Las fases móviles se usan en función de la polaridad de los compuestos a separar.


Existen diferentes interacciones intermoleculares que hacen que los compuestos orgánicos se unan a la superficie adsrobente a mayor o menor fuerza dependiendo de las naturaleza polar o no polar del compuesto.
En los compuestos polares se originan interacciones débiles.
mientras que en los compuestos polares se producen interacciones mas fuertes y directas.




Si los compuestos separados en una cromatografía en columna son coloreados, el progreso de la separación se puede monitorizar visualmente.
Se recogen secuencialmente pequeñas fracciones de eluatos en tubos y se analiza por cromatografía en capa fina. Una vez identificadas las diferentes fracciones que contienen el mismo producto, se analiza la identidad de los componentes por métodos espectroscópicos.
ANÁLISIS DE LOS ELUATOS DE LA COLUMNA
1.
2.
3.
FASE ESTACIONARIA:

Los más utilizados son gel de sílice (SiO2) y alúmina (Al2O3

FASE MÓVIL:
A continuación se enumera una lista de menor a mayor polaridad de las fases móviles comúnmente usadas: 
Hexano
Tolueno
Diclorometano
Cloroformo
Dietil éter
Acetato de etilo
Acetona
1-Propanol
Etanol
Metanol
Agua

Preparación de la columna

Empacamientos
Relleno de columna se comporta como filtro, 3 moléculas:
Permeables, fraccionables y excluidas

Para seleccionar la fase estacionaria se debe tener en cuenta el tipo de separación a efectuar.
Característica del eluyente empleado como fase móvil es que debe arrastrar los diferentes componentes, sin interactuar con la muestra ni con la fase estacionaria.
Se requiere de un solo disolvente durante el análisis. Inconveniente relación de viscosidades.

Problemas asociados a las columnas

Cromatograma de exclusión
Esta cromatografía, es una técnica adecuada para conocer la distribución de pesos moleculares de los polímeros.

Durante la elución
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