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Prueba Bioquimica SIM

Prueba Bioquimica SIM
by

Fran Pérez Palomo

on 9 March 2015

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Transcript of Prueba Bioquimica SIM

Ciertas bacterias tienen la capacidad de reducir el tiosulfato produciendo sulfuro de hidrógeno.





El sultado de hidrógeno es un gas incoloro se requiere un indicador para su visualización como el Sulfato de hierro y amonio



Precipitado Negro
1.FUNDAMENTO

SIM
Sulfuro-Indol-Movilidad

Gregory Brack Díaz
Isabel Gómez Gómez


El triptofano es un aminoácido que puede ser oxidado por determinadas bacterias formando indol.






El indol se combina con el reactivo Kovacs o Erlich



Anillo rojizo



Pone de manifiesto si la bacteria es móvil o no
2.MEDIO DE CULTIVO
- 30 g del polvo deshidratado en 1 litro
de agua purificada.
- Reposar 5 minutos.
- Calentar con agitación frecuente y hervir
durante un minuto para disolución total.
- Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave
a 121°C durante 15 minutos.
- Enfriar y solidificar en posición vertical.
- Color ámbar del medio preparado
.
- pH del medio 7.3
Reactivos: Para la prueba del Indol.


Reactivo Kovacs
p-dimetilamino benzaldehído (DMABA)
Alcohol amílico (puede sustituirse por Alcohol butílico)
HCl concentrado

Reactivo Ehrlich
p-dimetilamino benzaldehído
Alcohol etílico (absoluto)
HCl concentrado

3. TÉCNICA
Inoculación:
A partir de un cultivo de 18-24 horas en medio sólido. Siembra por punción profunda con aguja de inoculación recta de una sola colonia aislada. Se debe inocular el centro del tubo, y la punción debe abarcar 2 tercios de profundidad del medio de cultivo desde la superficie. Es importante que la siembra se realice en línea recta.

Incubación:
Durante 24 horas, a 35-37 °C, en aerobiosis.

Interpretación de los resultados:
Observar la movilidad y el color del medio de cultivo. Posteriormente realizar la prueba del Indol.


Prueba del Indol

Se recomienda emplear el reactivo Kovacs, el reactivo Ehrlich es más recomendado para fermentadores como
Flavobacterium
y con anaerobios.
Agregar de 3 a 5 gotas directamente al tubo incubad, agitar el tubo con suavidad.
Si a las 24 horas de incubación la prueba es negativa se aconseja seguir incubando 24 horas más y repetir la prueba.


Sulfuro de Hidrógeno
4. INTERPRETACIÓN
DE LOS RESULTADOS
Aparición de precipitado negro




Prueba + para producción de
Sulfuro de hidrógeno
INDOL
Aparición de un anillo
rojizo en la superficie



Prueba + para la producción de Indol
MOVILIDAD
Se observa crecimiento mas allá de la zona de inoculación.




Prueba + para la movilidad
5. UTILIDAD E IMPORTANCIA
6. EJEMPLOS
Se emplea para la identificación y diferenciación de miembros de la familia Enterobacteriáceas en función de la producción de Hidrógeno sulfuro, Indol y la Movilidad.
Limitaciones
- En las bacterias aerobias estrictas, que sólo crecen en superficie, la movilidad puede ser difícil de observar.

- Algunas bacterias productoras de melanina como
Morganella morganii
(bacilos gram -) pueden dar un color parduzco, que no debe confundirse con el color negro debido a la producción de ácido sulfhídrico.





Gracias por su atención
Bibliografía

http:www.britanialab.coproductos/327_hoja_tecnica_es.pdf.
http: //britanialab.com.ar/esp/productos/b02/simedio.htm
http: //www.uprm.edu/biology/cursos/micro/pruebas.htm
http: //depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3c_PruebasBioquimicas_17461.PDF
http: //www.academia.edu/4858992/Atlas_de_pruebas_bioquimicas_para_identificar_bacterias
http:www.ictsl.net/download/microbiologia.pdf
Jean F. MacFaddin. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica. 3ªed. Editorial media Panamericana.
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